三种同期发情方法在受体山羊的对比试验

摘 要：采用CIDR＋FSH、 CIDR＋FSH＋PG、CIDR＋PMSG三种组合方案对胚胎移植过程中的受体山羊进行同期发情实验，结果表明，CIDR＋PMSG组合的同期发情效果最好，试验羊的发情率达96.2%，发情羊中排卵并形成功能性黄体的比率达90.7%，其同期发情效果优于其他二种组合，因此，CIDR＋PMSG激素组合更适宜在生产实践中推广应用。关键词：同期发情；CIDR；FSH；PG；PMSG作为胚胎移植技术的关键环节，同期发情和超数排卵一直是此项技术的研究热点。其中，同期发情是利用某些生殖激素处理母畜，改变这些母畜的自然发情周期，人为的使群体母畜在同一段时间内集中发情。在胚胎移植过程中，使供体母畜与受体母畜处于同一生理阶段（即妊娠阶段）是胚胎移植的基本要求，因为受体母畜只有处于妊娠阶段时才能接受供体母畜提供的优质胚胎。有实验表明，在羊的鲜胚移植过程中，供体与受体同期发情时间越接近，胚胎移植后受体母羊的妊娠率越高。同期发情技术中常用的药物有孕激素、前列腺素、孕马血清促性腺激素、促卵泡素等。生产上这些激素可以单独使用，也可以组合成不同处理方案，但最优处理方案目前尚有争议。为了进一步研究受体山羊的同期发情技术，我们结合胚胎移植工作设计了三个不同的组合方案，对山羊同期发情效果进行了对比分析，现将具体结果及方法报道如下。1　材料与方法1. 1　试验时间及地点试验于2004年10月20日至2005年1月22日在天津市团兴种羊场进行。1. 2试验羊只选择及饲养管理所选供试羊均为2～3岁、经产1～2胎、无繁殖缺陷及疾病的马头山羊母羊及本地土种山羊。供试羊单独组群饲养，根据营养需要配置日粮，日喂3次。1. 3试验药品CIDR（羊用孕激素阴道栓），加拿大，每枚栓含炔诺酮0.3g；FSH（促卵泡素），宁波市激素制品有限公司，生产批号20030629，100 IU/支；PG（前列腺素），上海市计划生育研究所，生产批号030413，0.2mg/支；PMSG（孕马血清促性腺激素），加拿大，生产批号20030726，200IU/支。1.4同期发情处理方案1.4.1　同期发情处理所用激素　3种同期限发情方法的激素组合是：(1) CIDR＋FSH，（2）CIDR＋FSH＋PG，（3）CIDR＋PMSG。其中各激素的用量分别为：CIDR0.3g/只羊，FSH 200IU/只羊、PG0.1mg /只羊、PMSG400IU/只羊。1．4.2处理方法　首先向试验母羊阴道内埋植CIDR，第16天撤栓，撤栓当日根据激素组合方案对试验母羊肌肉注射FSH、PG或PMSG。具体处理方法见表1。表1　三种同期发情处理方案

1.5发情鉴定及黄体观察从撤除CIDR栓后12 h开始，每隔12小时用性欲旺盛、无疾病并戴有试情布的公羊试情，母羊接近公羊、摇尾、接受公羊爬跨或母羊互相爬跨者判定为发情，96小时内发情者为同期发情处理有效。发情结束后5天用腹腔镜观察发情羊卵巢上排卵及黄体发育情况。2结果与分析CIDR＋FSH、CIDR＋FSH＋PG、CIDR＋PMSG三种同期发情试验结果见表2。表2三种不同处理方案同期发情试验结果

由表2可知，3种处理均能达到诱导同期发情的目的，其发情同期率分别为87.4%、87.5%、96.2%，三者之间差异显著（p＜0.05）。其中，CIDR＋PMSG方案处理效果最好，其同期发情率比CIDR＋FSH、CIDR＋FSH＋PG提高了8.8%、8.9%。三个方案中处理羊发情后正常排卵并形成功能黄体的比率分别为77.6%、79.6%、90.7%，三者之间差异显著（p＜0.05）。其中，方案3的处理结果是最好的。从处理羊的总有效率来看，三种方案之间差异显著（p＞0.5）。其中，方案3的处理结果是最好的。3讨论与小结母山羊发情的外部行为表现是接近公羊、摇尾、接受公羊爬跨或母羊互相爬跨，而内在表现是卵巢上卵泡的发育、成熟和排卵过程。可以说，卵巢上没有卵泡的发育，母羊就不发情。由于母羊的发情是由各种生殖激素控制的，因此，利用外源激素可以破坏单只母羊的自然发情周期，使群体母羊在一段时间内集中发情。山羊的发情周期平均是21天，从卵巢的机能和形态变化方面可分为卵泡期和黄体期两个阶段。卵泡期是在周期性黄体退化引起血液中孕酮水平显著下降之后，卵巢中的卵泡迅速生长发育、成熟并进行排卵的时期，此时母羊出现行为上的特殊变化，即发情。排卵后，卵巢上破裂的卵泡发育为周期性黄体，随即出现一段较长的黄体期。这时在黄体分泌的孕激素的作用下，卵泡的发育成熟受到抑制，母羊不表现发情行为。如果母羊没有妊娠，卵巢上的黄体维持一段时间后退化，随后再出现一个卵泡期；如果妊娠，卵巢上的黄体转变为功能性黄体，并一直持续到母羊生产，生产结束后，功能性黄体仍然会退化，随后再出现卵泡期。卵巢上的黄体期和卵泡期就是这样周而复始变化的。随着发情周期的变化，动物体内激素的分泌量也呈现明显的周期性变化。卵巢上处于黄体期时，黄体分泌孕激素达到高峰，引起子宫内膜增厚、充血，分泌物增多，同时抑制卵巢上的卵泡发育，从而为妊娠作好准备。当黄体退化，卵泡发育时，促卵泡素的分泌量越来越多。因此，促使母羊同期发情一般有两种手段。一种是延长卵巢黄体期的方法，即给一群母羊同时施用外源孕激素，抑制其卵巢上卵泡的生长发育及其发情表现；经一定时间后再停用孕激素，由于没有外源激素的控制，自身卵巢上的黄体也已经退化，于是母羊卵巢上出现卵泡发育，引起母羊发情；另一种方法是缩短卵巢的黄体期，即利用PG等药物加速黄体的消退，使卵巢提前摆脱体内高水平孕激素的控制，于是母羊卵巢上的卵泡同时开始发育，以达到同期发情的目的。FSH和PMSG都有促进卵泡发育、成熟及排卵的作用。生产中为了减少母羊同期发情的时差，提高同期发情效果，常先用抑制卵泡发育的孕激素等药物，再配合促进卵泡发育、成熟、排卵的FSH、PMSG等药物，有时还配合使用PG等药物。其中，孕激素常用其类似物——十八甲基炔诺酮，PG也是合成的类似物——氯前列烯醇。本试验中用到的两种药物也是这些。卵巢上已完成排卵并形成功能黄体，说明母羊已进入妊娠状态，而这才是同期发情处理的最终目标。因此，本试验中设计这一指标，可以更有效地反映不同方案同期发情的处理效果。在此次试验中，应用三种方案对受体山羊进行同期发情处理，均获得了满意的效果，其中，以CIDR＋PMSG组合同期发情效果更佳，发情表现率达96.2%，与李俊杰等（2003）、肖西山等（2005）等的实验结果一致。因此，采用CIDR＋PMSG组合对山羊进行同期发情处理更适宜在生产实践中推广应用。关于CIDR的埋栓时间、各种激素的剂量等因素对山羊同期发情效果的影响，还有待进步研究。