猪蓝耳病弱毒疫苗对猪瘟抗体水平有怎样的影响？

摘要：为探索猪群免疫猪蓝耳病弱毒疫苗对猪瘟免疫抗体水平的影响，本试验通过对某规模猪场进行了为期1年的蓝耳病抗体与猪瘟抗体水平监测。试验结果表明猪蓝耳病弱毒疫苗免疫后蓝耳野毒感染率平均达到64%，蓝耳抗体S/P平均值均已超过2.5，猪蓝耳病弱毒疫苗免疫之后，猪瘟抗体阳性率平均值仅为77%，且抗体离散度平均值仅达到39，两项指标均较差，猪瘟抗体不合格。说明猪蓝耳病弱毒苗不能对该场的蓝耳病起到保护作用，不能有效的控制蓝耳野毒感染;同时由于猪蓝耳病弱毒苗的使用反而造成了猪瘟抗体水平的偏低。

关键词：猪蓝耳病弱毒疫苗 猪瘟 抗体 影响

猪蓝耳病与猪瘟仍是我们养猪业最常见的2种病毒性疾病，在生产实践中，猪蓝耳病、猪瘟混合感染的情况也越来越多，同时2种疾病都有可能引起“猪高热病综合症”，现已成为危害我国养猪业的最重要疾病，是疫病防控的重点。当前，针对这2种疾病的防治主要是以疫苗免疫为主，但这2种疾病免疫时间较接近，且蓝耳病病毒的感染可引起机体的免疫抑制。为探索猪蓝耳病弱毒苗对猪瘟抗体水平的影响，对广东某1600头基础母猪规模猪场进行了为期1年的抗体水平监测。了解其在免疫了猪蓝耳病弱毒株JXA1-R后对猪瘟抗体水平的影响。

1试验材料与方法

1.1试验材料

1.1.1试验动物

广东某1600头基础母猪群规模猪场，每次随机抽取100份血清样品检测。

1.1.2检测试剂

猪瘟抗体检测ELISA试剂盒、蓝耳病抗体检测ELISA试剂盒(均为美国IDEXX公司产品)。

1.1.3 主要试验仪器

微量加样器;Elx800型酶标仪。

1.1.4试验用疫苗 猪瘟弱毒疫苗(传代细胞源);高致病性猪蓝耳病弱毒疫苗(JXA1-R株)

1.2 试验方法

蓝耳与猪瘟疫苗采用普免的方式：3个月1次，一年4次。全场公、母猪1月份、4月份、7月份和10月份的第一周免疫猪瘟弱毒疫苗2头份，全场公、母猪2月份、5月份、8月份和11月份的第一周免疫蓝耳弱毒疫苗JXA1-R株2头份。小猪2周龄免疫蓝耳弱毒苗1头份，4周龄与9周龄分别免疫猪瘟疫苗1 头份与2头份。本试验从2012年的11月份首次全场免疫了蓝耳弱毒疫苗后，2013年的1月份、4月份、7月份和10月份的25号检测蓝耳与猪瘟抗体水平，对猪场内的30头公猪全部进行采血检测，经产母猪随机抽取100头进行检测，7周龄与12周龄小猪随机抽取50头进行检测。2013年该猪场重胎母猪出现流产比例达到8%，产出的胎儿中死胎比例达到12%，保育猪消瘦，咳嗽，死亡率达到15%。

1.3 ELISA试验方法及判断标准

ELISA试验方法及判断标准，参照IDEXX公司试剂盒的说明和标准执行。猪瘟抗体ELISA试验成立条件是：阴性对照的平均OD450值>0.5，阳性对照的阻断率>50%。判断标准：阻断率<40 40="" 50="">50%为阳性值。蓝耳抗体检测(IDEXX)ELISA 的S/P比例：S/P < 0.4 阴性;0.4 ≤ S/P ≤ 2.5 弱毒疫苗感染，产生抗体;S/P>2.5 野毒感染，产生抗体。

1.4统计学处理

试验数据用SPSS13.0软件进行统计学分析，将统计结果以“均数±标准差”表示，并进行方差分析和采用LSD法进行多重比较。

2 结果

2.1 从图1可知，0.4 ≤ S/P ≤ 2.5 为蓝耳弱毒疫苗感染所产生的抗体;S/P>2.5为蓝耳野毒感染所产生的抗体。公猪蓝耳抗体阳性率达到94%，野毒感染比例达到63%;经产母猪蓝耳抗体阳性率达到95%，野毒感染比例达到61%;7周龄与12周龄小猪蓝耳抗体阳性率达到99%，野毒感染比例达到70%。由图2可知，公猪蓝耳抗体离散度为52%，抗体平均值为2.82;经产母猪蓝耳抗体离散度为47%，抗体平均值为2.85;7周龄与12周龄小猪蓝耳抗体离散度为43%，抗体平均值为2.99。结果表明，所有猪均蓝耳野毒感染明显，蓝耳弱毒苗对该猪场的蓝耳病不能起到保护作用。

2.2 由图3可知，猪瘟抗体阻断率>50%为阳性值。公猪猪瘟抗体阳性率达到44%;经产母猪猪瘟抗体阳性率达到52.7%;7周龄与12周龄小猪猪瘟抗体阳性率达到57.5%。由图4可知，公猪猪瘟抗体离散度为37%，抗体平均值为53.2%;经产母猪猪瘟抗体离散度为37%，抗体平均值为51.8%;7周龄与12周龄小猪猪瘟抗体离散度为42.5%，抗体平均值为55.2%。结果表明，整个猪场的猪瘟抗体水平偏低，离散度不够理想，对整个猪群的猪瘟保护率不高。

3 讨论

猪蓝耳病弱毒疫苗对猪瘟免疫抗体的影响通过对本试验的结果分析发现高致病性猪蓝耳病弱毒疫苗(JX-A1-R株)免疫后蓝耳野毒感染率高达64%，蓝耳抗体S/P平均值均已超过2.5 ，表明该猪场蓝耳病病毒较活跃，已经感染了蓝耳野毒，说明该疫苗不能有效的控制蓝耳病。猪瘟抗体阳性率平均值仅为77%，且抗体离散度平均值仅达到 39%，2项指标均较差，说明猪瘟抗体不合格。因此，我们可以得知高致病性猪蓝耳病弱毒疫苗(JX-A1-R株)免疫对猪瘟细胞苗免疫产生明显的干扰或抑制作用。这与张凤华等[1]报道免疫猪蓝耳病弱毒苗对猪瘟免疫效果产生明显的干扰作用基本一致。这很有可能与蓝耳病病毒的发病机理有较大关系，蓝耳病病毒在复制时与肺泡巨噬细胞的受体结合，直接导致肺泡巨噬细胞的碎裂溶解，延缓了肺泡巨噬细胞对抗原处理和递呈作用，从而导致宿主发生免疫调节紊乱[2]。同时蓝耳病病毒作用于免疫系统的T淋巴细胞，造成T淋巴细胞各亚群的比例下降[3]，从而抑制了机体对其他病原体的免疫反应。同时蓝耳病病毒还具有“抗体依赖性增强作用”，又对猪瘟弱毒疫苗的免疫抗体产生有抑制作用，由此可见蓝耳病弱毒疫苗免疫是一把双刃剑，有利有弊。据杜喜忠等[4]报道，2种疫苗免疫间隔时间7d，仍然有明显干扰作用。因此，猪场应结合自己的实际情况来决定是否免疫蓝耳弱毒苗。在2013年的李曼世界养猪大会上，工程院院士杨汉春教授就明确指出我们应少用蓝耳弱毒苗，更加不能使用不同毒株的蓝耳弱毒苗(蓝耳病病毒易发生变异重组)，而应采用净化的方式来控制蓝耳病。现在这一观点已得到绝大多数专家、学者以及规模养猪场管理者的认可。