家禽血液采集、保存及送检的技术与方法

随着我国养鸡业日益向规模化、集约化方向发展，鸡病也呈现出新的特点，如混合感染增多，病症复杂化和非典型化。为了给疾病的预防、控制、净化提供技术支持，必须执行日常疫病监测制度，在此过程中，鸡的血液采集是一项重要的常规性和前提性工作，准确快速的采血技术可以减少鸡只应激，避免造成鸡只不必要的死亡，还可使监测结果更为可靠。血样的采集看似简单，但真正操作起来，其难度和强度较大，集专业知识和操作技巧于一体。笔者结合长期的临床实践，主要针对与鸡采血技术相关的问题进行介绍。

一、主要器材

5mL一次性塑料注射器、试管、试管架、5％碘酊棉球、75％酒精棉球、干棉球、标签纸、记号笔、相关表格等。

二、采血前的准备工作

采血人员必须2人以上，需经过专业培训，熟练掌握采样技巧，并遵循严格的无菌操作规程。兽医人员到鸡场采样时，要严格遵守鸡场消毒防疫等相关规定，口罩、乳胶手套、防护帽、防护服、防护鞋穿戴整齐后方可进入现场。

采血的地点和时间应符合要求。采血场所应有充足的光线。夏季室温最好保持在25℃～28℃，冬季则在1 4℃～20℃。如果鸡处于产蛋期间，最好等到下午大部分鸡产完蛋后采血，以免应激反应引起产蛋下降。

采血时用的注射器和试管保持清洁干燥，并且注射器要有足够的强度、使用灵活且方便可靠、外包装未破损、在有效期内使用。

三、采血方法

采血方法的选择，主要取决于采血的目的、所需血样或血清的数量以及鸡的日龄等，视实际情况而定。凡用血量较少的检验，如血涂片．可刺破鸡冠取血；用中等量血时，可以从静脉血管采集，如检测血清中禽流感、新城疫抗体效价；当需血量较多时，可以从心脏采集，如配制鸡红细胞悬液。雏鸡可采用跖骨内侧静咏采血法、颈静咏采血法；青年鸡、育成鸡比较多的应用翼下静脉采血法、心脏采血法。

1、鸡冠采血法

多用于采血量较少的采血，用针头刺破鸡冠即可。吸取血液时用手挤压鸡冠一次，毛细管可吸取30～80ul血液。此法操作简便，但采完血后要用浓碘酒涂抹伤口止血，既预防感染，又能制止因出血而引起的啄冠。

2、颈静脉采血法

鸡右侧颈静脉较左侧粗，故常采用右侧颈静脉采血。左手以食指和中指夹住鸡头部，并使头偏向左侧，无名指、小指和手掌握住躯干、拇指轻压颈椎部以便静脉充血怒张。常规消毒后，右手持注射器，针头倾斜45。沿血管方向一侧0．3～0．5cm刺人静咏，再与血管平行进针0．2～0．5cm抽取血液.采血完毕后，压迫伤口处止血。

3、跖骨内侧静脉采血法

鸡跖骨内侧静脉采血法适合于雏鸡，其优点是易于保定，血管位置明显，并且血管游离性小。

助手一手固定两翼根部，另一手固定一只脚，按住跖骨内侧的静咏，此时脚部静脉突起，常规消毒后，右手持注射器与跖骨皮肤呈10。顺血管方向进针取向。跖骨内侧静脉采血是向心方向，采血时进针角度不能太大，回抽活塞的速度要特别缓慢。

4、翼下静脉采血法

翼下静脉采血法是鸡的采血方法中最常用的。采血时，最好有助手保定鸡。助手左手抓鸡的两只脚，右手抓鸡的两只翅膀，将鸡侧放于地面，并用大拇指压迫翅膀根部静脉，使静咏充分充血，以方便采血操作。采血者用酒精棉球消毒翅静脉窝区后即可进针，稍稍将针头轻插进血管，轻拉话塞，注意观察针筒内有无血液被吸出，当发现有血液开始被吸出时，必须保持注射器位置不动，让血液缓缓吸人注射器针筒内，达到所需的采血量后，助手用干棉球压迫血管上的伤口约30秒止血。

压迫翅膀根部静脉血管时，不能用力太大、压得太紧，否则造成血管充血过分，针头容易滑出血管。

进针技巧要掌握好。为避免血液直接流出体外造成鸡体失血过多，在距离静脉窝大约0．3cm处，使针管与近心端血管的夹角为45。，进针最好是将针头的切口面向上，针头轻挑起表皮，由表皮与肌肉之间的空隙，往血管的远心端方向推针前行至血管上面，再将针管与血管重叠成一条直线刺入血管。进针不宜过深，如刺穿血管，皮下很快血肿，采血失败。

要注意针头方向。在采血中出血顺畅，固定针头不动，轻拉活塞抽血2mI左右。如果发现很快不出血，可将针头左右旋转，同时轻拉活塞直到抽出血，防止血管壁吸住针头，导致血流受阻。

翼下静脉采血时，抽血速度要保持缓慢，静咏血管回血流速慢，内压突然降低易使血管壁接触针尖而阻塞了针头，影响采血。

若需要反复多次采血，应自离心端开始，以免发生栓塞而影响整条静脉。

翼下静脉采血前一定要用酒精棉球消毒，酒精有扩张血管作用。采血完毕，要用干棉球压迫采血部位，不要用酒精棉球，因为酒精会引起溶血，造成血液凝固不良，不利于止血。

5、心脏采血法

鸡心脏采血对心脏有损伤，也易伤及肺脏等其他脏器，引起内脏出血，影响鸡的生长发育，甚至会造成死亡，特别是雏鸡，常因针头刺破心脏和肝脏导致出血过多而死。心脏采血虽然难度大，但是采血速度快、血量多、效率高，适宜于多量血液时使用。鸡心脏采血有侧卧法和仰卧法。

侧卧采血法：助手右手抓住鸡双腿，左手握住两翅膀，使鸡右侧卧，左侧面向上，放在小桌子上。采血者自龙骨突起前缘引一直线到翅基，再由此中点向髓关节引一直线，此线前1／3和中1／3的交界出有一凹陷，即是心脏采血进针部位。或者寻找由胸骨走向肩胛部的皮下大静脉，心脏约在该静脉的分支下侧，有时用食指触摸可感觉到心脏跳动。用酒精消毒后，以碘酊标记采血部位。7#针头刺入时，如触及胸骨可稍拔出，针头向右偏一点避开胸骨，再将针头向里刺入，边刺边抽动活塞，若剌人心脏，便有血液涌入注射器。术毕，局部消毒。

仰卧采血法：鸡仰卧保定，鸡头部朝向采血者，并使颈部及两腿伸展，拔去胸上部少许羽毛，用手指在胸骨上方，嗉囊下方摸得一凹窝，局部常规处理，右手持7#针，自胸骨上方凹窝斜向前下方心脏方向，与鸡躯体成45。刺入，边剌边抽动活塞，若刺入心脏，便有血液涌入注射器。术毕，局部消毒。鸡仰卧采血应在嗉囊空虚时进行，较为方便。

四、鸡采血时的注意事项

采血时做好现场记录，规范填写采血表格，包括鸡场名称、鸡的品种、日龄、样品数量、免疫情况等项目，每份样品做好标记，严防损失、混淆和污染。

采血量要根据检测要求采取。样品布点应符合代表性、准确性、合理性和科学性的原则，一般一个批次的鸡群至少采集15份样品。采集的样品应涉及不同的鸡舍，同一鸡舍的四个角落、中间位置都要采集血样，这样才具有说服力。

采血留下的废弃物，进行集中焚烧或深埋等无害化处理。

五、血液样品的保存与送检

采集到血液后，应立即将针头拔掉，把注射器内的血液沿着试管壁徐徐注入，不能有气泡，也不能振荡。逐一编号，仔细核对，倾斜放置。

血液样品夏天在常温下，冬天在25℃～37℃温水中放置1h左Z右，即可析出血清，血清析出后需冷冻保存。

采集制作鸡红细胞悬液时，5mI注射器里应先放入2mL抗凝剂，抗凝剂用3．8g柠檬酸三钠溶于100mL蒸馏水中即可。

血液样品送检时，在保温箱中加适量的冰块防止血液变质，送检过程中尽量防止剧烈振荡。